本试剂盒根据犬细小病毒(CPV)、犬冠状病毒（CCoV）的基因特异片段分别设计引物及荧光探针（CPV-FAM、CCoV-Cy5），同时在犬基因特异片段上设计內质控引物及HEX荧光探针，以样品核酸作为模板，在同一反应管内进行两种目的基因和内质控基因的多重RT-PCR检测。扩增试剂中添加dUTP和温度敏感型UNG酶可有效减少气溶胶等的污染，降低假阳性风险。

*1：该引物及探针混合液中包括犬细小病毒(CPV)、犬冠状病毒（CCoV）和犬源内质控的引物、探针等，该混合液使用及保存时请尽量避光。

§   将以上配制的反应体系充分混匀后，分装每个反应管中各17 µL。取3 µL 模板DNA/RNA，加入相应反应管中，混匀并作好标记。

§   在荧光PCR 扩增仪上进行以下反应：UNG酶消化25 ℃ 5 min，反转录55 ℃ 5 min，预变性95 ℃ 2 min；循环 95 ℃ 5 s，60 ℃ 30 s，共40 次，每次循环的第二步（60 ℃ 30 s）收集荧光信号（报告基团“CPV-FAM、IC-HEX、CCoV-Cy5”，淬灭基团“None”）。