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本试剂盒采用探针法多重实时荧光PCR方法检测猪全血、血清、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、骨髓及口鼻拭子等样品中非洲猪瘟病毒（ASFV）的DNA，适用于非洲猪瘟流行野毒及MGF360-505R缺失毒和CD2V与MGF360-505R联合缺失毒的检测。
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组成 |
100头份 |
贮藏条件 |
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阴性对照（无核酸酶水） |
1 mL |
-20℃ |
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阳性对照 |
20 µL |
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PCR 反应液 |
900 µL |
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荧光探针 |
650 μL |
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说明书 |
1 份 |
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试剂 |
体系 |
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无菌无核酸酶水 |
4×（N+1）µL |
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PCR 反应液 |
8×（N+1）µL |
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引物、荧光探针混合液 |
6×（N+1）µL |
将以上配制的反应体系充分混匀后，分装每个反应管中各18 µL。
分别取2 µL 模板DNA，加入相应反应管中，混匀并作好标记。在荧光PCR 扩增仪上进行以下反应：95 ℃ 2 min；循环 95 ℃ 10 s，58 ℃ 35 s，共40 次，每次循环的第二步（58 ℃ 35 s）收集荧光信号。（报告基团“FAM、HEX、ROX”，淬灭基团“None”）防污染体系在预变性步骤（95 ℃ 2 min）之前进行消化步骤50 ℃ 5 min。
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