本试剂盒采用探针法实时荧光PCR方法(含猪源内质控)检测猪全血、血清、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、骨髓及口鼻拭子等样品中非洲猪瘟病毒(ASFV)的DNA,适用于非洲猪瘟病毒的检测,本试剂盒无法区分出基因缺失型病毒。AD-001-0为普通探针法;AD-001-1为防污染体系,添加dUTP和UNG酶可有效减少气溶胶等的污染,降低假阳性风险。
组成 | 100头份 | 贮藏条件 |
阴性对照(无核酸酶水) | 1 mL | -20℃ |
阳性对照 | 20 µL | |
PCR 反应液 | 900 µL | |
非洲猪瘟引物、探针、内质控混合液* | 900 μL | |
说明书 | 1 份 |
在荧光PCR 扩增仪上进行以下反应:95 ℃ 2 min;循环 95 ℃ 5 s,60 ℃ 30 s,共45 次,每次循环的第二步(60 ℃ 30 s)收集荧光信号。(报告基团“非洲猪瘟基因-FAM、内质控-HEX”,淬灭基团“None” 使用ABI 7500仪器时,由于无HEX通道建议用VIC通道代替,退火时间设置至少为31 s)。防污染体系AD-001-1在预变性步骤(95 ℃ 2 min)之前进行消化步骤50 ℃ 2 min。
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