产品介绍
本试剂盒采用探针法单重实时荧光PCR方法检测猪全血、淋巴结、胰脏、脾脏、回肠、肝脏、肾脏、扁桃体、排泄物及细胞培养物等样品中猪瘟病毒(CSFV)的RNA，适用于猪瘟病毒的检测。AD-005-0为普通探针法；AD-005-1为防污染体系，添加dUTP和温度敏感型UNG酶可有效减少气溶胶等的污染，降低假阳性风险。
产品组成
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组成 |
100头份 |
贮藏条件 |
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反转录酶混合液 |
110 µL |
-20℃ |
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阴性对照（无核酸酶水） |
1 mL |
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阳性对照 |
20 µL |
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PCR 反应液 |
900 µL |
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荧光探针 |
220 μL |
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说明书 |
1 份 |
产品指南
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试剂 |
体系 |
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无菌无核酸酶水 |
7×（N+1）µL |
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反转录酶混合液 |
1×（N+1）µL |
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PCR 反应液 |
8×（N+1）µL |
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引物、荧光探针混合液 |
2×（N+1）µL |
将以上配制的反应体系充分混匀后，分装每个反应管中各18 µL。
分别取2 µL 模板RNA，加入相应反应管中，混匀并作好标记。在荧光PCR 扩增仪上进行以下反应：反转录50℃ 5 min，预变性95 ℃ 2 min，循环 95 ℃ 10 s，60 ℃ 35 s，共40 次，每次循环的第二步（60 ℃ 35 s）收集荧光信号（报告基团“HEX”，淬灭基团“None”）。防污染体系在反转录步骤（50 ℃ 5 min）之前进行消化步骤25 ℃ 5 min。
