本试剂盒采用探针法多重实时荧光RT-PCR方法检测母猪乳汁、排泄物、肛门拭子及细胞培养物等样品中猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪轮状病毒（PRoV）的RNA，适用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的检测。

*1：PTP为猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒英文简称PEDV、TGEV、PRoV首字母缩略而来。

*2：该引物及探针混合液中包括猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒和猪源内质控的引物、探针等，该混合液使用及保存时请尽量避光。

§   将以上配制的反应体系充分混匀后，分装每个反应管中各17 µL。取3 µL 模板DNA/RNA，加入相应反应管中，混匀并作好标记。

§   在荧光PCR 扩增仪上进行以下反应：UNG酶消化25 ℃ 5 min，反转录55 ℃ 5 min，预变性95 ℃ 2 min；循环 95 ℃ 5 s，60 ℃ 30 s，共40 次，每次循环的第二步（60 ℃ 30 s）收集荧光信号（报告基团“FAM、HEX、ROX、Cy5”，淬灭基团“None”）。