组成 |
100头份 |
贮藏条件 |
阴性对照(无核酸酶水) |
1 mL |
-20℃ |
阳性对照 |
20 µL |
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PCR 反应液 |
900 µL |
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非洲猪瘟引物、探针、内质控混合液* |
900 μL |
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说明书 |
1 份 |
*内质控混合液中包括其引物、探针。
试剂
体系
PCR 反应液
8×(N+1)µL
非洲猪瘟引物、探针、内质控混合液
8×(N+1)µL
将以上配制的反应体系充分混匀后,分装每个反应管中各16 µL。
分别取4 µL 样品,加入相应反应管中,混匀并作好标记。在荧光PCR 扩增仪上进行以下反应:50 ℃ 2 min,95 ℃ 2 min;循环 95 ℃ 5 s,60 ℃ 30 s,共45 次,每次循环的第二步(60 ℃ 30 s)收集荧光信号。(报告基团“非洲猪瘟基因-FAM、内质控-HEX”,淬灭基团“None” 使用ABI 7500仪器时,由于无HEX通道建议用VIC通道代替,退火时间设置至少为31 s)。
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